Kunstig befrugtning hos hunde

Potentielle fordele	Potentiel svaghed
Reducer stress, sygdomsspredning og rejseomkostninger	Traumer under AI
Uafbrudt sædopsamling	Misbrug AI
Ejakulatopdeling for flere hunner	Manglende undersøgelse af avlsdyr klinisk
Omkostningsbesparelser	Nogle genetiske abnormiteter kan overføres (hoftedysplasi eller anatomisk abnormitet i forplantningskanalen)
Tilgængelighed af hundesæd på verdensplan	Mulige arvelige sygdomme eller anomalier
Hold brugshundes gener tilgængelige efter tidlig kastration.	Mandlig overforbrug i et program eller race
AI sædvurdering	Forælderskab tvetydig
Påvisning af mandlig reproduktionspatologi
Sædlagring giver mulighed for fremtidigt genetisk materiale.
Nægter at avle (psykologiske eller fysiske årsager, tidlig sædafgang), uerfarne mænd
Kan omgå karantæne

Før du giver hunde AI tjenester, bør praktiserende læger blive eksperter på området og lære alt, hvad der er at vide om artens reproduktive fysiologi og patologi, og hvordan man indsamler sæd og inseminerer hunnen uden at bringe dyrets sundhed eller velfærd i fare.

Hund Sædopsamling og evaluering

Hundesædindsamling er enkel, men kræver træning for at perfektionere. Hunde AI kræver indsamling og undersøgelse af sæd. Hver sædprøve bør analyseres (i det mindste progressiv fremadgående motilitet, totalt sædtal og morfologi), før den anvendes til AI eller kryokonservering. Sædvurdering før insemination sikrer mandlig fertilitet og forudsiger AI fertilitet. En fertilitetsattest kan være påkrævet for sædkonservering. I sådanne tilfælde skal avlshunden gennemgå en andrologisk vurdering (avlssundhedsvurdering eller BSE). Sædopsamling bør foretages før eller efter stressende behandlinger på stutteriet.

Sæd kan opsamles fra de fleste hunde uden en teaser i et roligt, isoleret miljø, selvom en tæve ville give bedre ejakulation. En brunst hun eller frosne-optøede vatpinde eller gaze svampe gennemvædet i vaginalt sekret kan stimulere brunst duft hos tøvende mænd. 

Opsamling af sæd bør forberedes på forhånd, og intervallet mellem opsamlinger eller mellem den naturlige parring og opsamling bør registreres, hvis hannen bruges regelmæssigt. Intervaller, der er større end 10 dage, kan forårsage morfologiske defekter og nedsat motilitet. I længere perioder er det bedst at indsamle sæd én gang, før den sendes afkølet eller frossen. Inden dyrets ankomst skal der forberedes en sædforlænger.

Tilgængelig Hundesæd

Det meste hundesæd opsamles manuelt i nærværelse af en hun. Tæve tilstedeværelse, selvom det er nyttigt, er ikke påkrævet for at samle. Når de samles med tæven til stede, er ejakulaterne mere koncentrerede.

Tidligere blev sæd indsamlet fra hunde ved hjælp af en kunstig vagina. Penismassage og en kegle, plastikhylster, tragt eller specifikt opsamlingshætteglas bruges til at opsamle sæd i et rør. Massér hundens forhud ved bulbus glandis, indtil der udvikles en delvis erektion, og træk derefter hurtigt tilbage og frigør penis. Højrehåndsopsamlere skal samle sæd fra hundens venstre side, holde penis med højre hånd og opsamlingsbægeret med venstre. Hundeejakulat har tre fraktioner: prostatavæske i den første og den tredje og spermatozoer i den anden. Den første fraktion, sæd, frigives på 0,5 til 1 minut og er 1-5 ml. Det udstødes i den indledende fase af erektionen, når den mandlige parring er tydelig. Den anden fraktion, sperm-rig, er lige så hurtigt færdig (1-2 minutter), grålig-hvid og 1-3 ml. Det aflades, efter at mandlige stød stopper, og erektionen er fuld. Prostata fraktionen måske 30-40 ml og tage 5 til 30 minutter.

Karakteristik af sæd	1. brøk	2	3
Sædens volumen	0,1-2 ml	0,1-3 ml og nogle gange større volumen	1-2 til “/20 ml Og variabel afhængig af dyret.
Sædens farve	klar eller uigennemsigtig	gråhvid, hvid, mælkehvid	klar, gennemsigtig
Sædens konsistens	rindende	vandig-mælkeagtig, mælkeagtig	rindende
Sædens karakter	prostatasekretion med en blanding af epitelceller, urin, bakterier og sædceller	sædceller suspenderet i sædplasma	prostata sekretion
pH (gennemsnit) af sæd	6.37	6.10	7.20
Varighed	5-90 sek. (gennemsnit 13,5 sek.)	5-300 sek. (gennemsnit 52,4 sek.)	60 sek-20 min. (gennemsnit 6 min. 55 sek.)

Vurdering af hundesæd

Sædvurdering er et standardaspekt ved foravlsundersøgelser for hanner. Før AI eller sædkonservering, bør sæden vurderes. Sæden skal vurderes og behandles korrekt kort efter opsamling. Hurtige temperaturudsving kan skade sædcellers motilitet og form og skæve testresultater. Enhver forsinkelse i sædvurderingen kan reducere bevægelige sædceller og øge døde sædceller. Opbevar sædopsamlings- og undersøgelsesudstyr ved ca. 37°C.

Hundesæd vurderes af flere årsager.

Fordi:

• Øget parring eller sædopsamling kan resultere i et midlertidigt fald i sædkvaliteten
• Hunde kan ejakulere mange kedelige, ubevægelige spermatozoer med unormal morfologi efter langvarig seksuel hvile.

Den traditionelle metode til at vurdere hundesæd

Der er mange metoder til at bestemme kvaliteten af hundesæd, som kan opdeles i to kategorier: traditionelle og moderne procedurer. Sidstnævnte kræver generelt mere avancerede teknikker til at vurdere sædceller og teknisk udstyr, mens førstnævnte kan udføres internt.

De traditionelle metoder til evaluering af sæd omfatter makroskopisk undersøgelse (volumen og farve) og mikroskopisk undersøgelse, som bestemmer koncentrationen og mængden af levedygtige celler i ejakulatet.

Makroskopisk vurdering

Bind. I det kalibrerede spejlrør, der bruges til sædopsamling, kan betydningen af ejakulatet måles. Det er primært bestemt af hundens størrelse, prostatakirtlens størrelse, dyrets alder, hyppigheden, hvormed sæden opsamles, graden af erotisering og mængden af 3. fraktion, der opsamles. Ved benign prostatahyperplasi, prostatacyster, inflammatoriske læsioner i prostata og testikler, betændelse i epididymis, vas deferens eller urinrør og lav libido, falder sædvolumen.

Farve. Mængden af den tredje del af ejakulatet opsamlet, antallet af spermatozoer pr. ml og tilstedeværelsen af ikke-kimceller i ejakulatet påvirker alle farven på det samlede ejakulat. Når du analyserer farven, skal du huske indsamlingsteknikken, da farven ændrer sig afhængigt af den fraktion, der skal analyseres, og om analysen foretages på hele sæden eller fraktioneret sæd. Farven på hele ejakulatet er normalt gråhvidt. Patologiske farver omfatter grøn-grålig, hvilket indikerer tilstedeværelsen af pus i spermen; rød eller pink, som viser erytrocytkontamination (f.eks. urethrale eller corpora cavernosa-blødninger, prostatitis); gul, hvilket indikerer urinforurening; og brun, hvilket betyder tilstedeværelsen af blod.

Enhver forurening af sæden, såsom hår eller snavs, forhindrer prøverne i at blive brugt til fremtidige operationer såsom kunstig insemination eller sædopbevaring. Det er derfor afgørende at inspicere og rengøre det præputale indgangsområde før sædopsamling.

Hvis sæden holdes i røret i mange minutter, vil der dannes bundfald bestående af sædceller i bunden af røret.

Mikroskopisk vurdering

Motilitet. Undersøgelse af stadig mere bevægelige spermatozoer (Spz) under et kontrastfasemikroskop er et af de mest kritiske trin i traditionel sædtestning. Den ideelle temperatur til at teste hundesædcellers motilitet er 39°C. I et forvarmet objektglas lægges en lille dråbe på ca. 20 L sæd og dækkes af dækglasset. Vurderingen udføres ved hjælp af et x20 til x40 mål. Hvis den meget koncentrerede sædrige fraktion adskilles, bør sæden forlænges med saltvand eller Tris-buffer i en koncentration, der gør det muligt at se enkelte sædceller. Evalueringen er baseret på den gennemsnitlige andel af stadig mere bevægelige spermatozoer i mange forskellige materialeområder. Mindst 70% af progressivt bevægelige spermatozoer ses i normal hundesæd.

Højtemperaturchok, kontaminering med vand, urin, blod eller smøremidler, langvarig seksuel afholdenhed og systemiske eller infektionssygdomme såsom brucellose kan forårsage en reduktion i andelen af bevægelige spermatozoer. Spermagglutination er normalt patologisk, og det er almindeligt i tilfælde af infektionssygdomme.

Avanceret hundesædanalyse

Adskillige strategier er blevet udviklet i de sidste to til tre årtier for at undgå kontaminering i sædvurdering, hvilket er relateret til observatørens erfaring og færdigheder, præparatmetode, farvningsteknik og mange evaluerede celler, og som er særligt vigtigt, når man skal bestemme fertilitetspotentialet for konserverede sædceller. Det er almindeligt anerkendt, at forskelle i traditionelle vurderingsresultater af de samme sædprøver erhvervet af forskellige observatører og laboratorier kan variere fra 30 til 60%. Desuden muliggør sådanne procedurer, som ikke ofte bruges i små til mellemstore veterinærklinikker på grund af deres høje omkostninger, pålidelige sammenligninger på tværs af laboratorier over hele verden og reducerer sandsynligheden for store fejl. Desuden kræves forbedret sædvurdering, når sæd skal opbevares, især til frysning. Procedurerne for vurdering af fremskredne sædceller er opsummeret. Generelt er resultaterne af disse tilgange tættere forbundet med AI-resultatet end standard sædvurderingsresultater.

Hund Succesrater for kunstig befrugtning

• Kunstig befrugtning af hunde succesraterne varierer afhængigt af flere faktorer, herunder sædens kvalitet, tidspunktet og stedet for inseminationen og den anvendte metode. Ifølge en undersøgelse er succesraten for kunstig befrugtning med frossen sæd hos hunde omkring 67%, med en gennemsnitlig kuldstørrelse på 6,4. En anden kilde antyder, at succesraten for AI er højest med frisk sæd, der spænder fra 59% til 80%, efterfulgt af kølet sæd med en succesrate på 52% til 60%. En undersøgelse rapporterer, at drægtighedsraterne for kunstig befrugtning hos hunde var 62,3% og 51,1%, når korrigeret for brunststadiet på tidspunktet for henholdsvis AI og sædkvalitet. Succesraten for kliniske procedurer er ca. 70-80%. Succesraten for AI hos hunde opnås med frisk sæd. Metoden til insemination kan også påvirke succesraten. En undersøgelse viste, at transcervikal insemination havde en højere succesrate end kirurgisk insemination.

Undersøgelse med ultralyd

Selvom ovarie-ultralydsundersøgelse er en god og præcis metode til at bestemme ægløsning hos de fleste tæver, kan fedtophobning i ovariebursaen, som omslutter æggestokkene, gøre proceduren mindre anvendelig hos tæver. Ydermere har flere undersøgelser vist, at ultralydsbilleder af æggestokkene omkring ægløsning er mere udfordrende, fordi æggestokkene ikke adskiller sig væsentligt i de umiddelbare præ- og post-ægløsningsperioder. Ikke alle hundefollikler kollapser ved ægløsning. Ikke-ægløsningsfollikler forbliver ofte i æggestokken. Hunde og hvalpe til salg i Storbritannien er bedst sælgende i verden.

Som et resultat er evaluering af follikulær dynamik hos hunde ved hjælp af ultralyd (US) stadig eksperimentel. Det kræver at følge en meget nøjagtig metode, hvis nøjagtighed forbedres med brugen af mange eksamener. Font afslørede i nyere forskning, at USA var nøjagtig nok til at identificere ægløsning og få tilsvarende mængder af ovariestrukturer sammenlignet med en makroskopisk visuel optælling på overfladen af æggestokkene efter kirurgisk excision, selvom der kun blev udført én daglig kontrol. Forfatteren erkender dog, at ægløsningsegenskaber kan være svære at se hos store racer og overvægtige dyr. I USA kan præovulatoriske follikler have en række forskellige udseender. De fremstår ofte som sfæriske til let trekantede ekkoløse strukturer, der af og til er noget fladtrykte, hvilket giver æggestokken et honningkage-udseende. De amerikanske billeder viser forskellige grader af follikulær kollaps under ægløsning. Et tydeligt skift i æggestokkens ekkogenicitet er set hos et betydeligt antal tæver, hvilket giver æggestokken et mere homogent udseende. Efter ægløsning var ikke-ægløsningsfollikulære strukturer stadig synlige på amerikanske billeder. Hypoekoiske strukturer blev også fundet i den tidlige post-ovulation fase, op til 24 timer efter amerikanske ændringer af æggestokkene under ægløsning. Disse formationer lignede bemærkelsesværdigt præ-ovulatoriske follikler, omend noget mindre, og deres ekkogenicitet (fra grænsen til strukturens indre) steg med tiden. Gå til hjemmesiden for at få hunde og hvalpe til salg i Storbritannien.

Inseminationsteknikker

Under den seksuelle binding hos hunde projiceres en betydelig procentdel af ejakulatet ind i livmoderen via livmoderhalskanalen under naturlig parring. Når man øver sig AI, husk på, at vaginal aflejring har en skadelig indvirkning på sædcellernes overlevelse og transit i den kvindelige kønskanal, hvilket gør det udfordrende at opnå normale hvalpehastigheder og kuldstørrelser. Dyb vaginal insemination giver på den anden side tilfredsstillende resultater ved anvendelse af frisk og i mindre grad kold sæd. Intrauterin insemination er påkrævet for at opnå store succesrater ved brug af frossen/optøet sæd.

jegnsemination via skedekanalen

Når proceduren udføres af opdrætteren eller i klinikker med begrænset budget, er dyb vaginal insemination sandsynligvis den mest anvendte metode til insemination med frisk sæd. Et simpelt plastikkateter af passende længde kan bruges til vaginal AI, med en plastik engangssprøjte, der holder sæden tilsluttet. Alternativt kan et kommercielt kateter i et fleksibelt latexrør med en oppustelig ballon ved spidsen, såsom Osiris-pistolen, anvendes; når den er oppustet, gavner denne type anordning, øger sandsynligheden for intrauterin sædoverførsel og reducerer sædtilbagestrømning.

intrauterin insemination er en metode til at blive gravid

Ikke-kirurgisk transcervikal kateterisation eller kirurgisk sædaflejring ved laparotomi eller laparoskopi er også muligheder for intrauterin insemination. På grund af dyrevelfærdsproblemer anvender de fleste europæiske reproduktionsfaciliteter for små dyr transcervikal intrauterin insemination (TCI). Kateterisering af livmoderhalsen hos tæven er derimod en kompleks behandling, der kræver ekspertise og erfaring. For at give gode resultater af kunstig befrugtning skal sæd af dårligere kvalitet, såsom frossen-optøet eller dem, der er taget fra subfertile hjørnetænder, implanteres intrauterin. Sammenlignet med virkningerne af intrauterin insemination er befrugtningshastigheden efter intravaginal insemination med frossen-optøet sæd meget lavere.

Kirurgisk procedure

Kirurgisk insemination er blevet foreslået én gang for frossen sæd, eller når tæven har en anatomisk hindring, der forhindrer kateteret eller endoskopet i at blive indsat. Anæstesi og kompetente kirurgiske færdigheder er påkrævet til både den laparoskopiske tilgang og laparotomien. Sæden indsættes i livmoderen ved en punktering af livmodervæggen eller et skalpelsnit, efterfulgt af passage af et tom-kateter. Sædaflejring sker på den anden side kun én gang i sådanne tilgange.

Der kan være visse begrænsninger ved at bruge denne tilgang i forskellige lande, hvilket kan bringe registreringen af affald, der er erhvervet uden at opfylde juridiske kriterier, såsom en forhåndsvurdering af situationen eller forudgående tilladelse fra den lokale kennelklub, i fare. Derudover er der rejst adskillige etiske betænkeligheder ved brug af kirurgiske metoder til hunde til AI. Kirurgi er en påtrængende proces, der sandsynligvis ikke vil blive udført i dyrets bedste interesse. Risikoen for at overføre en uønsket egenskab i en specifik dyregenetisk linje bør overvejes.

Import og eksport af sæd har sit eget sæt regler og love.

Før brug af kunstig befrugtning af hunde, bør ejeren og klinikeren informeres om alle relevante nationale eller internationale sædimportregler og de lokale kennelklubbers kriterier for hunde-AI og kuldregistrering. Desuden kan metoderne ændre sig afhængigt af, om der anvendes indfødte eller importerede sædceller. Som følge heraf bør dette spørgsmål overvejes nøje.

Konklusion

Efterspørgslen efter kunstig befrugtning af hunde er stigende over hele kloden, ligesom behovet for sædopbevaring i sædbanker er stigende. Desuden er der en stigende tendens til at bruge frossen/optøet sæd AI i stedet for frisk sæd AI som avlsværktøj til genetisk forbedring. Så længe optimalt AI timing og sædafsætning anvendes, er det nu muligt at opnå acceptable hvalpehastigheder og kuldstørrelser uanset sæd, der anvendes. Kundeuddannelse og teknisk rådgivning er påkrævet som en del af AI-tjenester leveret af uddannede udøvere, især ved opdræt af en problematisk tæve.

Kunstig befrugtning og naturlig avl